是利用物质在互不混溶的两相液滴中的分配系数不同而达到分离目的。其最主要的优点是没有固体吸附剂，不存在着被分离物质的不可逆吸附问题，尤其是对极性大的皂甙化合物特别适用。如用氯仿一甲醇一正丙醇一水(45：60：6：40)，下层为固定相，上层为流动相，上行法层析，洗脱出各峰经TLC鉴定分别为人参皂甙Rbl、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf和Rgl。